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家禽病料采集和送檢要點
時間:2019-04-19      作者:華南生物-仲書官

  當前家禽疾病流行情況比較復雜,混合感染和繼發癥比較多見,臨床癥狀和病理變化也是非典型的多,所以實驗室診斷是動物疾病診斷的重要措施。同時,對病原跟蹤進行監測,能了解到疾病的流行動態。采樣的部位、方法、樣品的保存、運輸都直接關系到最終的診斷結果,本文就家禽的病料采集小結了一些采集的原則及方法,僅供參考。


1 病料采集的原則

1.1 無菌采集

采集病料,應全程無菌操作。特別是,微生物檢查、血清學檢查涉及的樣本。無菌采集的樣品,使用的器械、容器等嚴格消毒處理,嚴格遵守相應的無菌操作流程。

為了進行病原體的分離, 病料應盡可能減少污染。 因此, 在尸體剖檢前, 應將尸體浸泡在適宜消毒劑溶液中,既了皮膚和羽毛的消毒又減少在剖檢時羽毛和皮屑飛揚對病

料的污染。尸體剖檢時需先采集樣品,后剖檢,以免人為污染。

1.2 典型性

選取家禽的典型性,家禽要未經藥物治療,發病癥狀典型有代表,此要求對細菌傳染性疾病的檢查尤為重要。

選取病料有典型性,盡可能多的含有病原體。準備采集病料前,需初步診斷可能感染的病害,側重采集病原體常侵害部位。

1.3 適時性

根據檢測要求及檢測對象和檢驗項目的不同, 適當的采樣時機,對檢測結果很重要,因此樣品采集有時間上要求,應嚴格按規定的規程時間范圍取樣

采集病料時間,把握得當。從雞的尸體上取材料時,夏天不應遲于6--8h,冬季不應遲于12--24h。時間過長的,可能會導致病料組織腐爛,難以檢出應有的病原。必要時,應急宰早期發病的活體組織,自其身上獲取病料組織。

尸體剖開腹腔時,第一時間采取病料,減少病料因暴露于空氣中而造成的污染。

病料采集后, 如不能立刻進行檢驗, 應立即存放在冰箱中。

1.4 安全采集

采集樣本過程中,應注意操作的安全性,避免人員受感染,防治病原菌擴散,擴大感染面積。

2 病料的采集方法

2.1 組織和實質器官的采集

病料的采集必須采用無菌操作。心、肝、脾、肺和腎等實質性器官要在打開胸腹后第一時間采取,應注意的是,切取的組織應該包括病變部分及相鄰的健康組織。剖開腹腔后,必須注意腸管的完整,防止剪破腸道致使腸內容物污染組織器官。采集肝臟時注意不要弄破膽囊,以免膽汁污染組織器官。

2.2 液體病料的采集

血液、膽汁、膿腫液、滲出物等液體病料,使用滅菌吸管或注射器,經燙烙部位吸取病變組織的液體,將病料注入滅菌的離心管中,封好送檢。

2.3 全血的采集方法

用滅菌注射器自雞的心臟或翅靜脈采血 2-5 毫升,注入滅菌試管中。一般在血液中加入少量的抗凝劑( 5% 的檸檬酸鈉或肝素)。無菌抽血后緩慢混勻。

2.4 血清的采集方法

用滅菌注射器自雞的心臟或翅靜脈采血 1-2 毫升,注入滅菌試管中(青霉素瓶)擺成斜面,待血液凝固血清析出后,將血清吸出注入另一個滅菌試管中,備用;簡便方法為滅菌注射器采血后抽出一定的空間,斜放靜置析出血清,將血清注入1.5ml 小離心管中。

              

3. 病料的保存和處理

3.1. 采集的樣品應一種樣品放入一個密封袋或容器,立即密封,防止樣品損壞、污染和

外泄等意外發生。

3.2 裝樣品的密封袋或容器應貼上標簽,標簽要防止因凍結而脫落,標簽標明采集的時間、地點、號碼和樣品名稱,并附上發病、死亡等相關資料(紙質或電子版),盡快送實驗室。

3.3 根據樣品的性狀檢驗要求的不同,作暫時的冷藏、冷凍或其它處理。

 

4 病料的運送

4.1 因缺乏解剖及采集樣品的相關條件,需要運送整禽尸體時,用溫和型消毒液稍稍打濕羽毛(若無溫和型消毒劑可省,切不可使用具有腐蝕性消毒劑),裝入雙層防漏性好的塑料袋完整包裝,運送。 如果需要長途運輸,事先要整個尸體放入冰箱冰凍過夜。

4.2 裝在密封袋或容器中的病料應先密封,然后裝入泡沫箱或者冷藏瓶中運送。運送過程中嚴禁傾覆。

4.3 運送的病料必須標明:送檢單位、地址、送檢病料的品種、性別、日齡、種類、數量、死亡日期、送檢日期、檢驗目的、送檢者姓名,并附臨床病例摘要(發病時間、死亡情況、臨床癥狀、產蛋及飲食情況、免疫和用藥情況等)。

4.4 運送病料時,一定注意病料要低溫保存 (需足夠多的冰袋或干冰),供病毒學檢驗的樣品,數小時內要送到實驗室,只作冷藏處理,超過數小時的要冷凍處理,可將樣品放入-20℃冰箱內凍結后再裝入有冰袋或干冰的厚泡沫箱或者冷藏瓶內運送。


5 雞常見疫病的樣品采集

5.1禽流感的樣品采集、保存和運輸

禽流感病毒主要在呼吸道粘膜細胞內增殖。

5.1.1  病禽的樣品采集  ( 1 ) 至少從5只瀕死禽采集樣品。樣品包括: 泄殖腔拭子和氣管拭子各5; 氣管和肺的混樣 5腸管及內容物的混樣5; 肝、脾、腎和腦等組織樣品各5個。采集方法: ①泄殖腔棉拭子: 將棉拭子插入泄殖腔并旋轉使糞便沾在拭子上放在運輸緩沖液中。②氣管棉拭子: 活雞采樣時將棉拭子插入活雞的氣管內輕輕擦拭氣管壁并放入緩沖液中。死亡動物采氣管樣品時可在肺和氣管離體情況下進行采集應將棉拭子插入較深部位用力擦拭并按上述方法將棉拭子放在運輸緩沖液中。

③糞便樣品: 可從活禽市場采取新鮮糞便用棉拭子沾取糞便并將采好的樣品放在運輸緩沖液中。( 2 ) 分別采集至少10個病雞的血樣。采集10只病禽的血樣使用一次性采血器心臟或翅靜脈采血每只禽采血樣2-3 ml經離心或自然析出血清后將血清移到指形管中。封好口貼好標簽。不同禽只的血樣不能混合。

5.1.2 病死禽的樣品采集 無發病禽時可從死亡不久的病禽采樣采樣要求同病禽。棉拭子單獨放入容器容器中盛放含有抗菌素的p H值為7.0- 7.4 PBS 液。

5.2 雞新城疫樣品的采集、 保存和運輸

新城疫病毒存在于病雞所有器官、體液、分泌物和排泄物,以腦、脾和肺含毒量最高骨髓含毒時間最長。

樣品: 眼分泌物、泄殖腔拭子、脾臟、氣管粘膜、腦等。

  采取病料完成后,器械應先消毒再清洗,采取病料場地應徹底消毒,避免散播病原微生物,采集者用肥皂水洗滌再用消毒液洗手。要建立健全病料檔案管理制度,詳細記錄病料采集、使用、保存和銷毀情況。


附: 各種病料的采集部位

對于不同的疾病應采集不同的部位,不可盲目采集。列表中病料采集部位在前的表示發病時含毒量較高排位較前,采集病料應注意。  



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